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皮膚反應(yīng)(致敏)試驗儀
  • 更新日期:2025-04-27     瀏覽次數(shù):330
    • 皮膚反應(yīng)(致敏)試驗儀

      一、 儀器介紹

      實驗?zāi)康模?/span>

      確定重復(fù)接觸受試物對哺乳動物是否可引起皮膚反應(yīng)及其程度

      試驗概述:  

      局部封閉涂皮試驗(Buehler test,BT)和豚鼠最大值試驗(uinea pig maximisation test,GPMT)是實驗動物通過多次皮膚涂抹(誘導(dǎo)接觸)或皮內(nèi)注射受試物10d~14d(誘導(dǎo)階段)后,給予激發(fā)劑量的受試物,觀察實驗動物,并與對照動物比較對激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強度。

      小鼠局部淋巴結(jié)分析試驗(locallymph node assay,LLNA)是通過耳部給予實驗動物受試物,引起淋巴結(jié)的淋巴細胞增生,淋巴細胞增生與受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標記方法,測定試驗組與對照組淋巴細胞的標記率,并進行對比,獲得刺激指數(shù),評價致敏強度。應(yīng)用范圍

      應(yīng)用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領(lǐng)域

      符合標準:

      GB/T 15670.9-2017《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法第9部分皮膚反應(yīng)(致敏)試驗》

      二、試驗步驟:

      1. Buehler TestBT 

      動物模型:豚鼠

      操作步驟:

      誘導(dǎo)階段:通過封閉式皮膚涂抹受試物,持續(xù)10-14天。激發(fā)階段:間隔后再次涂抹受試物,觀察皮膚反應(yīng)。

      觀察指標:紅斑、水腫等皮膚炎癥反應(yīng)的強度(主觀評分)

      優(yōu)點:

      模擬人類皮膚接觸途徑,適用于局部制劑(如化妝品、外用藥物)

      無需注射,操作相對溫和。0

      缺點:

      敏感性較低,可能漏檢弱致敏物,。依賴主觀評分,存在實驗者偏差。0應(yīng)用場景:傳統(tǒng)化妝品、外用藥品的安全性評估。

       

      2.豚鼠最大值試驗(GPMT

      動物模型:豚鼠

      操作步驟:

      誘導(dǎo)階段:皮內(nèi)注射受試物(常聯(lián)合弗氏佐劑)結(jié)合皮膚涂抹,持續(xù)10-14天。

      激發(fā)階段:再次涂抹受試物,評估皮膚反應(yīng)。

      觀察指標:BT類似,但反應(yīng)更強烈(紅斑、水腫、硬結(jié))

      優(yōu)點:

      敏感性高,可檢測強致敏物和弱致敏物;

      國際的“金標準",尤其適用于化學(xué)品和工業(yè)原料。

      缺點:

      使用佐劑可能引發(fā)過度免疫反應(yīng),導(dǎo)致假陽性;

      動物痛苦程度較高,倫理爭議較大。

      應(yīng)用場景:工業(yè)化學(xué)品、強致敏性物質(zhì)(如染發(fā)劑、橡膠添加劑)的嚴格檢測。

       

      3.小鼠局部淋巴結(jié)試驗(LLNA

      動物模型:小鼠.

      操作步驟:

      誘導(dǎo)階段:連續(xù)3天耳部涂抹受試物。

      檢測指標:通過3H-胸苷或BrdU標記增殖的淋巴細胞,計算刺激指數(shù)(SI)觀察指標:淋巴結(jié)淋巴細胞增殖程度(SI>3判為陽性)

      優(yōu)點:

      客觀定量:減少主觀評分誤差;

      符合3R原則:動物用量少,無需激發(fā)階段,痛苦小;

      高效快速:試驗周期短(1)

      缺點:

      對某些物質(zhì)(如金屬鹽)敏感性不足,需使用放射性物質(zhì)或特殊設(shè)備,成本較高。

      應(yīng)用場景:歐盟等法規(guī)優(yōu)先推薦的替代方法,廣泛用于藥品、化妝品及化工產(chǎn)品的初篩。

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